世界银行没有人可以自由地成功

小编:当谈到蛋白质印迹实验中最重要的问题时,许多朋友也知道他们是否可以清楚地识别抗体和抗原。在许多情况下,没有选择抗体并且整个实验被破坏。这需要很多时间,浪费了很多时间

当谈到蛋白质印迹实验中最重要的问题时,许多朋友也知道他们是否可以清楚地识别抗体和抗原。在许多情况下,没有选择抗体并且整个实验被破坏。这需要很多时间,浪费了很多时间。
以下是选择高质量抗体的一些建议,抗体验证数据的重要性以及选择内部参考抗体的标准。
1.选择一个好品牌并关注渠道。
市场上有各种常见的抗体品牌,抗体是Western印迹实验中的定时炸弹。
大多数进口品牌在抗体质量,特异性,功效和储存条件方面都有很好的保证。
然而,许多国家品牌抗体在这方面并不令人满意。许多国家品牌抗体具有低特异性的问题,导致背景不清楚和许多非特异性条带。
在这里,我想提一下进口品牌的国内包装。一些经销商从外国品牌购买产品,并在稀释,重新包装和品牌重塑后将其出售给客户。这些抗体并不知道??每个人都知道,批次之间的区别。
每个人都需要特别注意。
当然,很多朋友会说外国品牌很贵,但在这里我想说最贵的产品实际上是无效的产品。因此,我们仍然需要自己看一下。总之,抗体仍然需要选择一些领先的品牌。同时,供应商渠道不容错过,必须保证供应链物流的专业性。
2.确保数据完整。
高质量抗体还需要完整的验证数据并注释详细信息。有三件事需要考虑:
(1),那些明显标记可用于WesternBlot实验
(2)有足够的数据支持抗体应用于组织或样品
(3)抗体推荐稀释浓度的定义,抗体识别位点是连续氨基酸序列的主要结构还是不连续氨基酸的构象位点
优质抗体经过严格的抗原序列选择和亲和层析纯化,以确保其特异性和纯度。
此外,通过蛋白质芯片,蛋白质印迹,免疫组织化学,免疫荧光等实验对各种组织样品进行了各种抗体检测,并获得了学术委员会认证。
完全支持实验数据,您可以防止因信息不完整而导致的选择错误。
3,有效的内部参考抗体是必不可少的
在Western blot中,内部参数可以纠正蛋白质定量和加载中的实验误差,并保证实验结果的可靠性。
大多数期刊要求在Western印迹实验中使用内部参考数据,以确保样品中的差异表达水平是可靠的。
一些常见的内部参考基因和抗体包括β-肌动蛋白,GAPDHPCNA,α-微管蛋白等。
换句话说,肌动蛋白,微管蛋白缺乏症有时会出现重复,GAPDH更稳定。
仔细观察有关细胞,自然和科学的文章,他们中的大多数都使用GAPDH作为内部参考。
值得注意的是,根据实验设计选择合适的内部参考抗体,内部参考抗体选择的原则仍然要回到自己的实验需要。参考参考
内部参考抗体
选择的依据
参考

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